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Jul 28, 2023Jul 28, 2023

Von Max-Planck-Institut für Marine Mikrobiologie, 5. Juni 2023

Wissenschaftler am Max-Planck-Institut für Marine Mikrobiologie haben herausgefunden, dass Methanothermococcus thermolithotrophicus, ein Methanogen, von dem man früher glaubte, dass es aufgrund der hohen Energiekosten und schädlichen Nebenprodukte des Prozesses nicht in der Lage sei, Sulfat in Sulfid umzuwandeln, tatsächlich auf Sulfat wachsen kann. Die Forscher entdeckten im Genom des Methanogens fünf Gene, die für Sulfatreduktions-assoziierte Enzyme kodieren, und durch die Charakterisierung dieser Enzyme stellten sie den ersten Sulfat-Assimilationsweg aus einem Methanogen zusammen.

Wie eine methanogene Mikrobe Stück für Stück einen Stoffwechselweg neu aufbaut, um Sulfat in einen Zellbaustein umzuwandeln.

Forscher haben herausgefunden, dass das Methanogen Methanothermococcus thermolithotrophicus Sulfat in Sulfid umwandeln kann, was bisherige Annahmen widerlegt. Durch die Identifizierung eines einzigartigen Sulfat-Assimilationswegs in diesem Methanogen eröffnen die Ergebnisse die Möglichkeit einer sichereren und kostengünstigeren Biogasproduktion durch Gentechnik.

Schwefel ist ein grundlegendes Element des Lebens und alle Organismen benötigen es, um Zellmaterial zu synthetisieren. Autotrophe Organismen wie Pflanzen und Algen nehmen Schwefel auf, indem sie Sulfat in Sulfid umwandeln, das in die Biomasse eingebaut werden kann. Dieser Prozess erfordert jedoch viel Energie und erzeugt schädliche Zwischen- und Nebenprodukte, die sofort umgewandelt werden müssen. Daher ging man bisher davon aus, dass als Methanogene bekannte Mikroben, denen normalerweise die Energie fehlt, nicht in der Lage wären, Sulfat in Sulfid umzuwandeln. Daher wurde angenommen, dass diese Mikroben, die die Hälfte des weltweiten Methans produzieren, auf andere Formen von Schwefel angewiesen sind, beispielsweise auf Sulfid.

This dogma was broken in 1986 with the discovery of the methanogen Methanothermococcus thermolithotrophicus, growing on sulfate as the only sulfur source. How is this possible, considering the energetic costs and toxic intermediates? Why is it the only methanogen that seems to be capable of growing on this sulfur speciesA species is a group of living organisms that share a set of common characteristics and are able to breed and produce fertile offspring. The concept of a species is important in biology as it is used to classify and organize the diversity of life. There are different ways to define a species, but the most widely accepted one is the biological species concept, which defines a species as a group of organisms that can interbreed and produce viable offspring in nature. This definition is widely used in evolutionary biology and ecology to identify and classify living organisms." data-gt-translate-attributes="[{"attribute":"data-cmtooltip", "format":"html"}]"> Spezies? Verwendet dieser Organismus chemische Tricks oder eine noch unbekannte Strategie, um die Sulfat-Assimilation zu ermöglichen? Antworten auf diese Fragen haben Marion Jespersen und Tristan Wagner vom Max-Planck-Institut für Marine Mikrobiologie nun gefunden und in der Fachzeitschrift Nature Microbiology veröffentlicht.

Doktorandin Marion Jespersen arbeitet an einem Fermenter, in dem M. thermolithotrophicus ausschließlich auf Sulfat als Schwefelquelle wächst. Bildnachweis: Tristan Wagner / Max-Planck-Institut für Marine Mikrobiologie

Die erste Herausforderung für die Forscher bestand darin, die Mikrobe dazu zu bringen, auf der neuen Schwefelquelle zu wachsen. „Als ich mit meiner Doktorarbeit begann, musste ich M. thermolithotrophicus wirklich davon überzeugen, Sulfat statt Sulfid zu essen“, sagt Marion Jespersen. „Aber nach der Optimierung des Mediums wurde Methanothermococcus zu einem Profi im Wachstum auf Sulfat, wobei die Zelldichten mit denen beim Wachstum auf Sulfid vergleichbar waren.“

„Richtig spannend wurde es, als wir das Verschwinden von Sulfat während des Wachstums des Organismus maßen. Dann konnten wir tatsächlich nachweisen, dass das Methanogen dieses Substrat umwandelt.“ Dadurch konnten die Forscher M. thermolithotrophicus sicher in Bioreaktoren im großen Maßstab kultivieren, da sie für ihr Wachstum nicht mehr auf das giftige und explosive Schwefelwasserstoffgas angewiesen waren. „Es lieferte uns genügend Biomasse, um diesen faszinierenden Organismus zu untersuchen“, erklärt Jespersen. Nun waren die Forscher bereit, sich mit den Details der zugrunde liegenden Prozesse zu befassen.

Um die molekularen Mechanismen der Sulfatassimilation zu verstehen, analysierten die Wissenschaftler das Genom von M. thermolithotrophicus. Sie fanden fünf Gene, die das Potenzial hatten, Enzyme zu kodieren, die mit der Sulfatreduktion in Zusammenhang stehen. „Es ist uns gelungen, jedes einzelne dieser Enzyme zu charakterisieren und so den gesamten Stoffwechselweg zu erforschen. Eine wahre Meisterleistung, wenn man seine Komplexität bedenkt“, sagt Tristan Wagner, Leiter der Max-Planck-Forschungsgruppe Mikrobieller Stoffwechsel.

Die Kaskade chemischer Reaktionen von Sulfat (SO42-) zu Sulfid (H2S). Bildnachweis: Marion Jespersen / Max-Planck-Institut für Marine Mikrobiologie

Indem die Wissenschaftler die Enzyme einzeln charakterisierten, stellten sie den ersten Sulfat-Assimilationsweg aus einem Methanogen zusammen. Während die ersten beiden Enzyme des Stoffwechselwegs gut bekannt sind und in vielen Mikroben und Pflanzen vorkommen, handelte es sich bei den nächsten Enzymen um eine neue Art. „Wir waren verblüfft, als wir sahen, dass es so aussieht, als hätte M. thermolithotrophicus ein Enzym aus einem dissimilatorischen sulfatreduzierenden Organismus gekapert und es leicht modifiziert, um seinen eigenen Bedürfnissen gerecht zu werden“, sagt Jespersen. Während einige Mikroben Sulfat als Zellbaustein aufnehmen, nutzen andere es zur Energiegewinnung in einem dissimilatorischen Prozess – wie der Mensch bei der Sauerstoffatmung. Die Mikroben, die eine dissimilatorische Sulfatreduktion durchführen, nutzen dazu einen anderen Satz von Enzymen. Das hier untersuchte Methanogen wandelte eines dieser dissimilatorischen Enzyme in ein assimilatorisches um. „Eine einfache, aber hochwirksame Strategie und höchstwahrscheinlich der Grund, warum dieses Methanogen auf Sulfat wachsen kann. Bisher wurde dieses spezielle Enzym nur in M. thermolithotrophicus und in keinem anderen Methanogen gefunden“, erklärt Jespersen.

Allerdings muss sich M. thermolithotrophicus auch mit zwei Giften auseinandersetzen, die bei der Sulfataufnahme entstehen. Dafür sind die letzten beiden Enzyme des Weges gemacht: Das erste, wiederum ähnlich einem dissimilatorischen Enzym, erzeugt Sulfid aus Sulfit. Bei der zweiten handelt es sich um eine neue Art von Phosphatase mit robuster Effizienz bei der Hydrolyse des anderen Giftes, kurz PAP genannt.

„Es scheint, dass M. thermolithotrophicus genetische Informationen aus seiner mikrobiellen Umgebung gesammelt hat, die es ihm ermöglichten, auf Sulfat zu wachsen. Durch das Mischen und Anpassen assimilatorischer und dissimilatorischer Enzyme schuf es seine eigene funktionelle Sulfatreduktionsmaschinerie“, sagt Wagner.

Hydrogenotrophe Methanogene wie M. thermolithotrophicus haben die erstaunliche Fähigkeit, Diwasserstoff (H2, beispielsweise künstlich aus erneuerbarer Energie hergestellt) und Kohlendioxid (CO2) in Methan (CH4) umzuwandeln. Mit anderen Worten: Sie können das Treibhausgas CO2 in den Biokraftstoff CH4 umwandeln, der beispielsweise zum Heizen unserer Häuser genutzt werden kann. Dazu werden Methanogene in großen Bioreaktoren gezüchtet. Ein aktueller Engpass beim Anbau von Methanogenen ist der Bedarf an dem hochgefährlichen und explosiven Schwefelwasserstoffgas als Schwefelquelle. Mit der Entdeckung des Sulfat-Assimilationswegs in M. thermolithotrophicus ist es möglich, Methanogene, die bereits in der Biotechnologie verwendet werden, gentechnisch so zu verändern, dass sie stattdessen diesen Weg nutzen – was zu einer sichereren und kostengünstigeren Biogasproduktion führt.

„Eine ungelöste brennende Frage ist, warum M. thermolithotrophicus Sulfat in der Natur assimilieren würde. Dazu müssen wir ins Feld gehen und sehen, ob die für diesen Weg erforderlichen Enzyme auch in der natürlichen Umgebung der Mikrobe exprimiert werden“, schließt er Wagner.

Referenz: „Assimilatorische Sulfatreduktion im marinen Methanogen Methanothermococcus thermolithotrophicus“, 5. Juni 2023, Nature Microbiology.DOI: 10.1038/s41564-023-01398-8

Wie eine methanogene Mikrobe Stück für Stück einen Stoffwechselweg neu aufbaut, um Sulfat in einen Zellbaustein umzuwandeln.