Zinkchlorid ist als Antibiotikum zur Biofilmprävention nach einer Septumplastik wirksam

Mar 23, 2023

Wissenschaftliche Berichte Band 13, Artikelnummer: 8344 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Bakterielle Infektionen im Biofilmzustand, die mit eingeführten medizinischen Geräten einhergehen, stellen weltweit ein massives Gesundheits- und Finanzproblem dar. Obwohl Bakterien im Biofilmzustand eine deutlich geringere Anfälligkeit gegenüber Antibiotika aufweisen, setzt der häufigste Behandlungsansatz immer noch auf Antibiotika, was das Phänomen antibiotikaresistenter Bakterien verschärft. In dieser Studie wollten wir beurteilen, ob die ZnCl2-Beschichtung von intranasalen Silikonschienen (ISSs) die mit dem Einsetzen dieser Geräte verbundenen Biofilminfektionen reduzieren und den übermäßigen Einsatz von Antibiotika verhindern und gleichzeitig Abfall, Umweltverschmutzung und Kosten minimieren kann. Wir haben die Fähigkeit von ZnCl2, die Bildung von Biofilmen auf ISS sowohl in vitro als auch in vivo zu verhindern, mithilfe des Mikrotiterschalen-Biofilmbildungstests, der Kristallviolettfärbung sowie der Elektronen- und Konfokalmikroskopie getestet. Wir fanden einen signifikanten Rückgang der Biofilmbildung zwischen der Behandlungsgruppe und der Wachstumskontrolle, wenn ZnCl2-beschichtete Schienen in der Nasenflora der Patienten platziert wurden. Diesen Ergebnissen zufolge können Infektionen im Zusammenhang mit der ISS-Insertion durch die Verwendung einer ZnCl2-Beschichtung verhindert werden, wodurch der übermäßige Einsatz und Missbrauch von Antibiotika vermieden wird.

Infektionen im Zusammenhang mit Medizinprodukten sind größtenteils für eine erhöhte Morbidität und Mortalität bei Patienten sowie für schwere finanzielle Verluste im Gesundheitswesen verantwortlich1. Derzeit erfordern eine Vielzahl medizinischer Prozesse in fast allen Bereichen der Medizin das Einbringen von Fremdkörpern in den Körper des Patienten, die schwere Infektionen verursachen können, die als fremdkörperbedingte Infektionen (FBRIs)2 bezeichnet werden. Die überwiegende Mehrheit dieser Infektionen wird durch Bakterien, insbesondere im Biofilmzustand, verursacht, die die Oberflächen eingeführter medizinischer Fremdgeräte besiedeln. Infektionen medizinischer Geräte treten typischerweise während des Implantationsverfahrens auf, da eine geringe Anzahl von Bakterien eingeimpft wird, die aus der Haut oder Schleimhaut des Patienten stammen. Die Impfung kann jedoch auch aus den Händen des OP-Personals, aus kontaminierten Desinfektionsmitteln und aus dem Krankenhausumfeld stammen2,3.

Die Septumchirurgie (Septumplastik), ein chirurgischer Eingriff zur Korrektur einer Nasenscheidewanddeformation, ist einer der häufigsten chirurgischen Eingriffe in der Gesichtschirurgie4,5,6,7. ISSs werden häufig bei der Septumplastik verwendet, um das operierte Septum und den verbleibenden Knorpel zu stabilisieren, die Schleimhautheilung zu fördern und Nasensynechie zu verhindern8,9,10. Die häufigsten Mikroorganismen, die mit Nasenschienen-bedingten Infektionen in Zusammenhang stehen, sind Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia und Enterobacter aerogenes11,12, hauptsächlich in Biofilmform.

Ein Biofilm ist eine organisierte Ansammlung von Mikroorganismen, die in einer selbst produzierten Matrix extrazellulärer Polymersubstanzen (EPS) eingebettet sind, die an einer biotischen oder abiotischen Oberfläche befestigt ist und in einem komplexen und dynamischen Prozess der reversiblen Anlagerung, irreversiblen Anlagerung, des Wachstums und der Differenzierung entsteht. und Verbreitung13. Der Biofilmzustand optimiert den Austausch von Plasmiden zwischen Bakterien, von denen einige oft multiresistente kodierende Gene enthalten. Daher stellen Biofilme auch die Gefahr dar, dass sich antibiotikaresistente Bakterien vermehren14,15.

Das Grundprinzip der geräteassoziierten Infektionskontrolle beruht eher auf Prävention als auf Behandlung, da eine schnelle Verschlimmerung der Infektion nach der Entwicklung von Biofilm durchaus möglich ist14,16. Derzeit sind Antibiotika die häufigste Behandlung für medizingerätebedingte Infektionen2,17. Aufgrund der geringeren Empfindlichkeit der Bakterien gegenüber Antibiotika im Biofilmzustand18 greift die Behandlung dieser Infektionen jedoch häufig auf die Entfernung des implantierten Geräts und, falls möglich oder erforderlich, auf dessen Ersatz durch ein neues Gerät2,19 zurück. Derzeit ist die wichtigste Maßnahme nach einer Nasenoperation die Verabreichung systemischer prophylaktischer Antibiotika, auch wenn die Wirksamkeit nicht allgemein anerkannt ist11,20. Es ist bekannt, dass über 70 % der bakteriellen Infektionen gegen eines oder mehrere der allgemein zur Infektionsbekämpfung eingesetzten Antibiotika resistent sind21. Dies hat zu einer massiven Suche nach alternativen antimikrobiellen Substanzen und alternativen Behandlungsansätzen zur Vorbeugung von bakteriellen und bakteriellen Infektionen im Biofilmzustand geführt2,16,22. Eine wichtige Strategie zur Verhinderung der Bildung von Biofilmen im Zusammenhang mit Medizinprodukten ist die Oberflächenmodifikation – das Auftragen von antibakteriellen oder Antihaftmitteln auf die Oberfläche des Medizinprodukts22,23. Angesichts der oben genannten Nachteile von Antibiotika geht der aktuelle Trend in die Entwicklung nicht-antibiotischer Beschichtungen für medizinische Geräte, beispielsweise metallbasierte Beschichtungen24,25.

Metalle werden seit Jahrzehnten als antibakterielle Wirkstoffe im täglichen Leben, in der Industrie, in der Landwirtschaft und im Gesundheitswesen eingesetzt. Bestimmte Metalle sind für die Biochemie des Lebens in allen Organismen von entscheidender Bedeutung und erfüllen Zellfunktionen, die nicht durch organische Moleküle ersetzt werden können. Sie gelten daher als essentielle Metalle, von denen die häufigsten antibakteriellen Elemente Zink, Silber und Kupfer sind26,27,28, 29. In hohen Konzentrationen ist Zink jedoch auch für Bakterienzellen toxisch, da es dort essentielle Reaktionen blockiert30,31. Es ist bekannt, dass Zink über ein breites Spektrum an antibakteriellen und antibiofilmischen Aktivitäten verfügt und sich auf viele Bakterienstämme auswirkt, indem es verschiedene zelluläre Prozesse stört und deren Wachstum wirksam hemmt30,31. Es wurde bereits gezeigt, dass Zinkchlorid (ZnCl2) eine antibakterielle und antibiofilmaktive Wirkung hat32,33, obwohl es nach unserem besten Wissen nicht zur Vorbeugung oder Behandlung von Infektionen im Zusammenhang mit Medizinprodukten eingesetzt wurde.

Wir stellten die Hypothese auf, dass die Verwendung einer ZnCl2-Beschichtung für medizinische Geräte die bakteriellen Infektionen, die mit dem Einsetzen dieser Geräte einhergehen, reduzieren und den unnötigen Einsatz von Antibiotika verhindern und gleichzeitig Abfall, Umweltverschmutzung und Kosten minimieren wird. Diese Studie konzentrierte sich auf Nasenschienen als Modellanwendung der ZnCl2-Beschichtung in medizinischen Geräten. Unsere Ziele waren daher folgende: (1) die antibakterielle und antibiofilmische Aktivität von ZnCl2 gegen klinisch isolierte Bakterien in vitro zu untersuchen; (2) Untersuchung der antibakteriellen und antibiofilmischen Aktivität von ZnCl2-beschichteten Schienen in vitro; (3) um die Wirkung einer längeren Anwesenheit von ZnCl2 zu untersuchen und eine mögliche lokale oder systemische Toxizität in vivo auszuschließen; und (4) um die Wirksamkeit von ZnCl2-beschichteten Schienen in vivo zu bewerten (vorläufige Studien).

Staphylococcus aureus-Stämme erwiesen sich sowohl für Plankton- als auch für Biofilmzellen als empfindlich gegenüber ZnCl2 und zeigten eine signifikante Abnahme der Lebensfähigkeit, wenn sie ZnCl2-Konzentrationen im Bereich von 0,9 bis 7,0 mM ausgesetzt wurden (Tabelle 1). Für Planktonzellen wurde der Wert der minimalen Hemmkonzentration (MIC) bei einer ZnCl2-Konzentration von 1,2 mM für beide Stämme erhalten, und die Werte der minimalen bakteriziden Konzentration (MBC) lagen im Bereich von 5,0 bis 7,0 mM. Für Biofilmzellen lagen die Werte der Biofilm-Präventionskonzentration (BPC) zwischen 0,9 und 1,0 mM. Es wurde festgestellt, dass E. aerogenes-Stämme sowohl für Biofilm- als auch für Planktonzellen empfindlich gegenüber ZnCl2 sind. BPC wurde für beide Stämme bei 2,0 mM erhalten, die MHK-Werte lagen zwischen 3,0 und 4,0 mM und MBC wurde nicht innerhalb des getesteten Bereichs gefunden. Für P. aeruginosa-Stämme wurde BPC bei 4,0 mM für beide Stämme erhalten. Für Planktonzellen innerhalb des getesteten Bereichs wurden jedoch keine MHK- oder MBC-Werte gefunden.

Die Biofilmbildung auf den ZnCl2-beschichteten Schienen von drei verschiedenen klinischen Bakterienstämmen, P. aeruginosa, E. aerogenes und S. aureus, wurde im Vergleich zur positiven Wachstumskontrolle von Nicht-Bakterienstämmen signifikant (p < 0,001) um 55–70 % gehemmt. ZnCl2-beschichtete Schienen (Daten nicht gezeigt). Die Hemmung wurde erfolgreich erreicht und blieb über die gesamte 168-stündige Inkubationszeit konstant, ohne signifikante Unterschiede.

CLSM wurde verwendet, um die Biofilmbildung von drei verschiedenen klinischen Bakterienstämmen, S. aureus, P. aeruginosa und E. aerogenes, auf ZnCl2-beschichteten Schienen und auf nicht ZnCl2-beschichteten Schienen als positive Wachstumskontrolle zu bewerten. Das Biofilmwachstum auf den Schienenoberflächen wurde mit zwei Methoden bewertet: erstens anhand der von Bakterien bedeckten Fläche (%), wodurch die Fähigkeit der Bakterien quantifiziert wurde, sich an der Schienenoberfläche anzuheften, und zweitens anhand der mittleren Signalintensität, wodurch die Menge an Biofilmmasse quantifiziert wurde . Anhand der gemessenen, von Bakterien bedeckten Fläche (%) (Abb. 1, rechte Spalte) wurden sowohl bei S. aureus als auch bei E. aerogenes keine signifikanten Unterschiede in der Fähigkeit zur Anhaftung an den Schienenoberflächen zwischen ZnCl2-beschichteten und nicht beschichteten Schienen festgestellt -ZnCl2-beschichtete Schienen. Eine signifikante Abnahme (p < 0,01) dieser Fähigkeit wurde bei P. aeruginosa festgestellt. Alle Stämme zeigten eine signifikante Abnahme (S. aureus und P. aeruginosa: p < 0,01, E. aerogenes: p < 0,05) der mittleren Biofilmmasse auf den ZnCl2-beschichteten Schienen im Vergleich zu den nur mit Polymer beschichteten Schienen (Abb . 1, linke Spalte und Abb. 2).

Von bakteriellem Biofilm bedeckte Fläche (%) und mittlere Signalintensität des Biofilms in vitro, bewertet durch CLSM. Biofilme aus Staphylococcus aureus (a,b), Pseudomonas aeruginosa (c,d) und Enterobacter aerogenes (e,f) wurden auf ZnCl2-beschichteten Schienen und auf nicht ZnCl2-beschichteten Schienen ohne ZnCl2 als positive Wachstumskontrollen gezüchtet. Stücke dieser Schienen wurden mit Propidiumiodid (PI) gefärbt und mittels CLSM hinsichtlich der Fläche jedes Stücks, die mit bakteriellem Biofilm bedeckt war (rechte Spalte), und der mittleren Signalintensität bewertet, wodurch die Menge des auf der Schienenoberfläche gebildeten Biofilms quantifiziert wurde (linke Spalte). ). P-Werte werden durch einen ungepaarten t-Test bereitgestellt (*p 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001).

Konfokale Produktion von bakteriellem Biofilm in vitro, bewertet durch CLSM. Biofilme aus Enterobacter aerogenes (a,d), Pseudomonas aeruginosa (b,e) und Staphylococcus aureus (c,f) wurden auf ZnCl2-beschichteten Schienen und auf nicht ZnCl2-beschichteten Schienen als positive Wachstumskontrollen gezüchtet. Stücke dieser Schienen wurden mit Propidiumiodid (PI) gefärbt und mittels CLSM bewertet.

Nach der Entfernung von ZnCl2-beschichteten Schienen aus den Nasenhöhlen von drei Patienten wurden die Schienenstücke mithilfe von CLSM auf die von Bakterien bedeckte Fläche (%) untersucht, wobei die Fähigkeit zur Anhaftung an der Oberfläche der Schiene quantifiziert wurde, und auf die mittlere Signalintensität, wodurch quantifiziert wurde Menge an Biofilmmasse. Zur negativen Wachstumskontrolle verwendeten wir nicht mit ZnCl2 beschichtete Schienen, die regelmäßig aus den Nasenhöhlen von zwei Patienten verwendet werden, die vor der Entfernung der Schienen 7 Tage lang eine Antibiotikaprophylaxe erhielten und von CLSM anhand derselben Kriterien bewertet wurden. Alle Behandlungspatienten zeigten eine signifikante Abnahme (p < 0,05) von über 67 % der mittleren Signalintensität in den ZnCl2-beschichteten Schienen im Vergleich zu Kontrollpatient 1 (Abb. 3a und 4). Es wurden jedoch keine signifikanten Unterschiede zwischen den Behandlungspatienten und dem Kontrollpatienten 2 festgestellt. In der von Bakterien bedeckten Fläche (%) fanden wir keine signifikanten Unterschiede zwischen den drei Behandlungsgruppen (Abb. 3b). Signifikante (p < 0,05) Rückgänge wurden beim Vergleich der von Bakterien bedeckten Fläche (%) zwischen Kontrollpatient 1 und Behandlungspatienten 2 und 3 sowie zwischen Kontrollpatient 2 und Behandlungspatient 3 festgestellt.

Mittlere Signalintensität (a) und von Bakterien bedeckte Fläche (%) (b) des Biofilmwachstums, in vivo, auf Schienen, nach dem Einsetzen, bewertet durch CLSM. Stücke von ZnCl2-beschichteten Schienen aus den Nasen von drei Patienten (den Behandlungspatienten) und nicht ZnCl2-beschichteten Schienen aus den Nasen von zwei Patienten, denen prophylaktische Antibiotika verabreicht wurden (die negative Wachstumskontrolle), wurden zur CLSM-Bewertung mit PI gefärbt. Die Schienenstücke wurden hinsichtlich der mittleren Signalintensität bewertet, wobei das Ausmaß des Bakterienwachstums auf der Oberfläche der Schiene (a) und die von Bakterienwachstum bedeckte Fläche (%) in jedem Stück (b) quantifiziert wurde. Die Ergebnisse, die sich laut Tukeys Honestly Significant Difference (HSD)-Test nicht signifikant voneinander unterscheiden, werden unter demselben Buchstaben gruppiert (p < 0,05).

Konfokale Produktion von bakteriellem Biofilm in vivo auf Schienen nach dem Einsetzen, bewertet durch CLSM. Teile von ZnCl2-beschichteten Schienen aus der Nase von drei Patienten (den Behandlungspatienten) (a–c) und nicht ZnCl2-beschichteten Schienen aus der Nase von zwei Patienten, denen prophylaktische Antibiotika verabreicht wurden (die negative Wachstumskontrolle) (d, e) wurden mit PI gefärbt und mittels CLSM ausgewertet.

Die Biofilmbildung von drei verschiedenen klinischen Bakterienstämmen wurde mittels Rasterelektronenmikroskopie (REM) untersucht. S. aureus, E. aerogenes und P. aeruginosa wurden gehemmt, wenn die Bakterien auf den ZnCl2-beschichteten Schienen gezüchtet wurden, im Vergleich zur positiven Wachstumskontrolle von nicht ZnCl2-beschichteten Schienen (Abb. 5). Alle Bakterienstämme zeigten eine geringe Bakterienlast auf den ZnCl2-beschichteten Schienen und eine hohe Bakterienlast auf den nicht ZnCl2-beschichteten Schienen.

Biofilmwachstum klinischer Bakterien auf ZnCl2-beschichteten Schienen und auf nicht ZnCl2-beschichteten Schienen, erfasst durch REM. Staphylococcus aureus (a–d), Enterobacter aerogenes (e–h) und Pseudomonas aeruginosa (i–l) wurden 48 Stunden lang auf ZnCl2-beschichteten Schienen (b,d,f,h,j,l) und bei positivem Wachstum gezüchtet Kontrollschienen ohne ZnCl2-Beschichtung (a,c,e,g,i,k). Die Bilder wurden mit einer Beschleunigungsspannung von 2 kV bei Vergrößerungen von 1000 (a,b,e,f,i,j) und 10.000 (c,d,g,h,k,l) ​​aufgenommen.

Alle ZnCl2-beschichteten Schienen, die nach einem Zeitraum von 7 Tagen in den Nasenhöhlen von drei Behandlungspatienten extrahiert wurden, zeigten eine geringe Bakterienbelastung (Abb. 6a–i) sowie Blutzellen, die nach der Operation an der Oberfläche der Schiene haften blieben (Abb. 6a). Nicht mit ZnCl2 beschichtete Schienen von Kontrollpatient 1 (Abb. 6j–l) zeigten eine mittlere Bakterienbelastung mit zwei Arten von Bakterienkolonien: Bazillus (Abb. 6k) und einem Kokkus (Abb. 6l). Kontrollpatient 2 (Abb. 6m–o) wies eine geringe Bakterienbelastung auf.

Schienen, die den klinischen Patienten nach einem 7-tägigen Zeitraum in den Nasenhöhlen der Patienten entnommen wurden, aufgenommen durch REM. ZnCl2-beschichtete Schienen (a–i) wurden nach der Septumplastik für einen Zeitraum von 7 Tagen in die Nasenhöhlen von drei Patienten eingesetzt. Reguläre nicht ZnCl2-beschichtete Schienen (j–o) wurden über einen Zeitraum von 7 Tagen in die Nasenhöhlen von zwei Patienten unter prophylaktischer Antibiotikabehandlung eingesetzt und dienten als negative Wachstumskontrollen. Schienen wurden aus den Nasenhöhlen der Patienten entfernt und mittels REM erfasst; Behandlungspatient 1 (a–c), Behandlungspatient 2 (d–f), Behandlungspatient 3 (g–i), Kontrollpatient 1 (j–l) und Kontrollpatient 2 (m–o). Die Bilder wurden mit einer Beschleunigungsspannung von 2 kV bei Vergrößerungen von 1000 (linke Spalte), 10.000 (mittlere Spalte) und 20.000 (rechte Spalte) aufgenommen.

Es wurden weder pathologische klinische Anzeichen noch histologische Unterschiede in der Nasenschleimhaut zwischen der Behandlungsgruppe mit ZnCl2-beschichteter Schiene und der Behandlungsgruppe mit nicht ZnCl2-beschichteter Schiene beobachtet (Daten nicht gezeigt).

Der Missbrauch und Missbrauch von Antibiotika in den letzten Jahrzehnten hat zu einem raschen und besorgniserregenden Anstieg der Zahl antibiotikaresistenter Bakterienstämme geführt, was zu einem starken Bedarf an der Suche nach alternativen antibakteriellen Substanzen geführt hat2,22,34. Obwohl nicht allgemein anerkannt, dass sie wirksam ist, ist die Antibiotikaprophylaxe bei Septumplastiken ein gängiges Verfahren zur Vorbeugung von Infektionen im Zusammenhang mit der Operationsstelle11,20. In einer kürzlich durchgeführten Studie11 konnte gezeigt werden, dass es nach der ISS-Einlage unabhängig von einer prophylaktischen Antibiotikatherapie zu Bakterienwachstum kommt, zusammen mit einem Anstieg antibiotikaresistenter Bakterien, was deutlich zeigt, wie dringlich es ist, den Einsatz der Antibiotikaprophylaxe als vorbeugende Behandlung bei Septumplastiken zu ersetzen. Daher schlagen wir vor, den Einsatz von Antibiotika durch die Einführung nicht-antibiotischer, antibakterieller ZnCl2-beschichteter Schienen als Ersatz für die reguläre ISS zu vermeiden. Nach unserem besten Wissen ist dies die erste Studie einer natürlichen antibakteriellen Beschichtung für ISS, die in vivo ohne die Gabe von Antibiotika getestet wurde.

In der vorliegenden Studie untersuchten wir den Einsatz von ZnCl2-beschichteten Nasenschienen als vorbeugende antibakterielle Behandlung gegen Infektionen nach einer Septumplastik, sowohl in vitro als auch in vivo. In unserer Studie fanden wir (1) einen Rückgang des Bakterienwachstums zwischen den behandelten Patienten und den Patienten mit negativer Wachstumskontrolle, wenn ZnCl2-beschichtete Schienen ohne den Einsatz prophylaktischer Antibiotika in die Nasenflora der Patienten eingebracht wurden, und (2) ZnCl2 konnte dies hemmen das Bakterienwachstum von Krankheitserregern, die als gefährliche antibiotikaresistente Bakterien gelten.

Ein wichtiges Ergebnis dieser Studie ist, dass ZnCl2 das Biofilmwachstum aller drei klinisch isolierten Krankheitserreger, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa und Enterobacter aerogenes, hemmen konnte, die alle von der WHO als antibiotikaresistente Bakterien als große Bedrohung für den Menschen angesehen werden und waren dass ihnen hinsichtlich der Dringlichkeit, neue Antibiotika gegen sie zu finden, der höchste „Prioritätsstatus“ eingeräumt wird34. Während das Biofilmwachstum aller getesteten Krankheitserreger gehemmt wurde, waren für gramnegative Bakterien höhere Konzentrationen an ZnCl2 erforderlich als für grampositive Bakterien. So wurde das Biofilmwachstum des grampositiven Staphylococcus aureus bei niedrigeren ZnCl2-Konzentrationen von 0,9 mM bis 1,0 mM gehemmt, während die Hemmung des Biofilmwachstums bei gramnegativen Pseudomonas aeruginosa und Enterobacter aerogenes höhere ZnCl2-Konzentrationen von 2,0 mM bis 4,0 mM erforderte (Tabelle 1). . Dieser Befund ist nicht überraschend, da gramnegative Bakterien resistenter sind als grampositive Bakterien und nur ein sehr kleiner Teil der gegen grampositive Bakterien entwickelten Verbindungen eine Wirkung gegen gramnegative Bakterien haben35. Daher ist die Fähigkeit von ZnCl2, sowohl grampositive als auch gramnegative Bakterien zu hemmen, ein wichtiges Ergebnis dieser Studie.

In-vitro-Ergebnisse zeigten einen signifikanten (p < 0,001) Rückgang der Biofilmbildung der klinischen Bakterien auf den ZnCl2-beschichteten Schienen um 55–70 % im Vergleich zur positiven Wachstumskontrolle von nicht ZnCl2-beschichteten Schienen (Daten nicht gezeigt). Die Hemmung hielt während der gesamten Testdauer von 168 Stunden an, was eine mögliche wirksame Hemmung des Biofilmwachstums auf den Schienen während ihres einwöchigen Aufenthalts in den Nasenhöhlen der Patienten zeigt. Mit Polymer beschichtete Schienen ohne ZnCl2 und nicht beschichtete kommerziell erhältliche Schienen zeigten keinen signifikanten Unterschied in der Biofilmbildung auf den beiden verschiedenen Schienen, was darauf hindeutet, dass die Oberflächenstruktur der Polymerbeschichtung keinen signifikanten Einfluss auf die Fähigkeit der Bakterien hatte, sich an der Oberfläche anzuheften. Vor dem Wirksamkeitstest in vivo wurde eine Toxizitätsbewertung an Ratten durchgeführt, wobei wir keine pathologischen klinischen Anzeichen oder histologischen Unterschiede in der Nasenschleimhaut zwischen der Behandlungsgruppe mit ZnCl2-beschichteten Schienen und der Kontrollgruppe mit nicht ZnCl2-beschichteten Schienen fanden (Daten nicht gezeigt). ).

Als eine Toxizität ausgeschlossen wurde, untersuchten wir die Wirksamkeit in vivo weiter, indem wir ZnCl2-beschichtete Schienen in die Nasenhöhlen von drei Patienten einführten. Um eine quantitative statt einer qualitativen Beurteilung zu erhalten, führten wir eine mikroskopische Untersuchung der Schienen mittels CLSM durch. Obwohl sich zwischen allen Patienten kein signifikanter Unterschied ergab, war die Fähigkeit der Bakterien, sich an den ZnCl2-beschichteten Schienenoberflächen anzuheften, geringer als bei den regulären, nicht ZnCl2-beschichteten Schienen von Patienten, die eine prophylaktische Antibiotikabehandlung erhielten, was eine negative Wachstumskontrolle darstellt (Abb. 5). Wir fanden jedoch eine signifikante (p < 0,05) Abnahme der mittleren Signalintensität, die die Menge an Biofilmmasse quantifiziert, um 66–72 % zwischen Kontrollpatient 1 und den drei Behandlungspatienten und eine nicht signifikante Abnahme um 57–72 %. 64 % der Biofilmmasse zwischen den drei Behandlungspatienten und dem Kontrollpatienten 2. Dies ist zu erwarten, da die Wahrscheinlichkeit, dass eine biofilmbedingte Infektion auf einer Polymerimplantatoberfläche auftritt, zwischen 65 und 80 % liegt36. Doch obwohl sich die Bakterien an der Oberfläche festsetzen konnten, hemmte die ZnCl2-Beschichtung das Biofilmwachstum auf den Schienenoberflächen während des einwöchigen Aufenthalts in den Nasenhöhlen der Patienten, was zu einer wirksamen Behandlung gegen ISS-insertionsbedingte Infektionen führte, ohne dass dies erforderlich war für prophylaktische Antibiotika, wobei die Behandlung mindestens genauso wirksam ist wie mit Antibiotika.

Zusammenfassend lässt sich aus unserer vorläufigen Studie schließen, dass ZnCl2 eine natürliche, wirksame und kostengünstige Lösung ist, die in der Lage ist, das Biofilmwachstum von Krankheitserregern zu hemmen, die als gefährlich gelten, z. B. antibiotikaresistente Bakterien, und gleichzeitig den Einsatz einer prophylaktischen Antibiotikatherapie nach dem Einsetzen von ISS überflüssig macht im Rahmen einer Septumplastik. Es sollte berücksichtigt werden, dass für die Umsetzung dieser Lösung in der klinischen Praxis eine größere Anzahl von Probanden untersucht und technische Verbesserungen an der Beschichtung vorgenommen werden sollten (gleichmäßigere Verteilung, einfachere Anwendung, längere Haltbarkeit der Beschichtung), obwohl dies statistisch signifikant ist ).

Die in dieser Studie verwendeten Bakterien wurden von der mikrobiologischen Abteilung des Hasharon Hospital (Petah Tikvah 4937211, Israel) bezogen, isoliert und bei –80 °C aufbewahrt. Alle Bakterien wurden aus der Nasenflora von Patienten isoliert, die nach Entfernung des ISS mit Antibiotika behandelt bzw. nicht behandelt wurden (Tabelle 2). Alle Stämme wurden in Lysogenie-Brühe (LB) (Difco) oder in festem LB-Medium mit 1,5 % Bacto-Agar (Difco) vermehrt. Die LB-Brühe enthielt pro Liter 10 g Trypton, 5 g Hefeextrakt und 5 g Natriumchlorid (NaCl). Für das routinemäßige Wachstum ließen wir jede Sorte 24 Stunden lang bei 37 °C auf festem LB wachsen. Später wurde eine Starterkultur hergestellt, indem eine Kolonie jedes Stammes in 5 ml flüssiges LB geimpft wurde. Anschließend wurden die Starterkulturen über Nacht bei 37 °C unter Schütteln bei 100 U/min inkubiert. Der Starter wurde dann entweder weiter inkubiert oder in der Brühe verdünnt, bis eine OD600 nm von 0,50 erhalten wurde, mittels Spektrophotometrie gemessen (WPA CO8000, Biochrom, Cambridge, Vereinigtes Königreich) und dann 1:100 in das entsprechende Versuchsmedium verdünnt. Für das Planktonwachstum verwendeten wir flüssiges LB und für das Biofilmwachstum stellten wir LBGM her, indem wir LB mit 1 % (v/v) Glycerin und 0,1 mM Mangansulfat (MnSO4) ergänzten33.

Die Identifizierung des Stammes erfolgte mithilfe der 16S-ribosomalen RNA-Sequenzierungsmethode37 unter Verwendung des GeneJET Gel Extraction and DNA Cleanup Micro Kit (Thermo Scientific) und der Primer 27F und 1492R38. Die Standard-DNA-Sequenzierung der Proben wurde von der Genomic Technologies Facility im Alexander Silberman Institute of Life Sciences der Hebräischen Universität Jerusalem durchgeführt. Für Staphylococcus aureus und Enterobacter aerogenes eine OD600 nm von 0,50 ≈ 1 × 108 KBE/ml und für Pseudomonas aeruginosa eine OD600 nm von 0,50 ≈ 1,5 × 108 KBE/ml.

Zinkchlorid (ZnCl2) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MI, USA) wurde in unserer Studie als antibakterielle Substanz in einer 1 M konzentrierten Lösung verwendet, die dem Wachstumsmedium in verschiedenen Verdünnungen zugesetzt wurde, bis die gewünschte Endsorte erreicht war Konzentrationen.

Die in dieser Studie verwendeten beschichteten Nasenschienen wurden aus dem Labor von Professor Michael Friedman (Pharmazieschule, Medizinische Fakultät, Hebräische Universität Jerusalem) bezogen. Polyethylenglykol 400, ein gewünschtes Lösungsmittelvolumen einer wässrigen Ethanollösung, wurde in einen Chemikalienbecher geeigneter Größe gefüllt, der mit einem Magnetrührstab ausgestattet war. Der Inhalt wurde bei etwa 35 °C mit einer Geschwindigkeit gemischt, die einen stabilen Wirbel erzeugte. Klucel™ Hydroxypropylcellulose HF wurde dann nach und nach zugegeben, um eine ordnungsgemäße Benetzung sicherzustellen, und bei 25 °C bis 35 °C gemischt, bis die Polymere vollständig aufgelöst waren, was visuell anhand eines klaren Glasobjektträgers beurteilt wurde. Anschließend wurde der Polymerlösung ZnCl2 zugesetzt und gemischt, bis es sich auflöste oder eine stabile Dispersion erhalten wurde. Die Fließeigenschaften wurden bewertet, indem 1 ml der Formulierung aus einer Spritze ohne Nadel abgegeben wurde. Die Beschichtung enthielt schließlich 0,3 g Polyethylenglykol 400, 0,7 g Klucel™ Hydroxypropylcellulose HF und 0,5 g ZnCl2 in 30 ml Ethanol/H2O 9:1 und 1,5 ml H2O. Silikonschienen (Grimaldi-Nasenschiene, N5, Exmoor Plastics Ltd, Vereinigtes Königreich) wurden auf jeder Seite durch Pipettieren der Formulierung, gleichmäßiges Verteilen und anschließendes Trocknen beschichtet. Überschüssige Beschichtung wurde entfernt oder zusätzliche Beschichtung hinzugefügt, um ein gleichmäßiges Gewicht der Beschichtung sicherzustellen. Vor der Durchführung von Experimenten mit den Schienenstücken wurden diese auf jeder Seite 1,5 Stunden lang mit ultravioletter (UV) Strahlung desinfiziert.

MIC ist definiert als die niedrigste Konzentration einer Substanz, die das sichtbare Wachstum einer Planktonkultur hemmt. MBC ist definiert als die niedrigste Konzentration einer Substanz, die das anfängliche Inokulum einer Planktonkultur um 99,9 % reduziert39. Um den MHK-Wert zu bestimmen, verwendeten wir bei den untersuchten Bakterienstämmen die Brühenverdünnungsmethode, wie sie in Balouiri et al.40 mit geringfügigen Modifikationen beschrieben wurde. Kurz gesagt wurde für jedes Isolat eine Starterkultur erzeugt und dann auf 1:100 in einer Platte mit 48 Vertiefungen verdünnt, und ZnCl2 wurde in allmählichen Konzentrationen, beginnend bei 0,5 mM und bis zu 10 mM, in jede Vertiefung gegeben. Anschließend wurden die Platten über Nacht bei 37 °C inkubiert und am nächsten Morgen auf Wachstum untersucht. Die MHK wurde anhand der Vertiefungen bestimmt, in denen es kein sichtbares Wachstum gab und die Konzentration von ZnCl2 am niedrigsten war. Um den MBC-Wert zu bestimmen, wurden 100 µL jeder Vertiefung mit höheren Konzentrationen als dem ermittelten MHK-Wert 24 Stunden lang bei 37 °C auf festes LB ausplattiert, wie zuvor beschrieben40. Dann wurden die Platten auf lebende Zellen gezählt (KBE/ml) und die MBC-Werte wurden als die niedrigste Konzentration bestimmt, bei der 99,9 % des ursprünglichen Inokulums abgetötet wurden. Für Konzentrationen innerhalb des getesteten Bereichs, in denen diese Kriterien nicht erfüllt waren, wurden MHK und MBC als nicht gefunden (NF) bestimmt. Ein Assay wurde in drei unabhängigen Experimenten durchgeführt, jeweils dreifach für jede ZnCl2-Konzentration.

BPC ist definiert als die niedrigste Konzentration einer antibakteriellen Substanz, die eine Reduzierung des Biofilmwachstums um 1 log bei OD650 nm bei gleichzeitiger Exposition der Bakterienimpfung und der antibakteriellen Substanz bewirkt39. Um den BPC-Wert zu bestimmen, führten wir mit einigen Änderungen einen Suszeptibilitätstest wie zuvor beschrieben39 durch. Ein Starter wurde auf 1:100 in LBGM-Medium verdünnt und zusammen mit schrittweisen Konzentrationen von ZnCl2 von 0,1 bis 0,9 mM in 0,1-mM-Schritten und 1,0–4,0 mM in 1,0-mM-Schritten in eine 96-Well-Platte (Rundboden, Nunc™) gegeben Schritte, mit vier Vertiefungen für jede ZnCl2-Konzentration. Nach 24-stündiger Inkubation bei 37 °C unter statischen Bedingungen wurden 100 µL jeder Vertiefung in eine neue 96-Well-Platte (Flachboden, Nunc™) überführt und die OD595 nm mit einem Plattenlesegerät (ELx808™, Bio-Tek-Instrumente, Vermont, USA). BPC wurde anhand der Vertiefungen mit der niedrigsten Konzentration bestimmt, die einen Wachstumsunterschied von mindestens 1 Log ergab. Ein Assay wurde in drei unabhängigen Experimenten durchgeführt, die jeweils vierfach für jede ZnCl2-Konzentration durchgeführt wurden.

1-cm2-Stücke der ZnCl2-beschichteten Schienen wurden zusammen mit Stücken beschichteter Schienen ohne ZnCl2 und unbeschichteten Schienen als positive Wachstumskontrolle in eine 24-Well-Platte (Nunc™) gelegt. Wir haben einen erzeugten Starter auf 1:100 in LBGM-Medium verdünnt und dann 150 µL auf die Oberseite jedes der beschichteten Schienenstücke pipettiert. Später wurde die Platte unter statischen Bedingungen bei 37 °C inkubiert und die Schienenstücke wurden nach 10 h, 24 h, 48 h, 72 h und 168 h auf Biofilmwachstum überprüft. Die Quantifizierung des Biofilms wurde mit dem zuvor verwendeten Mikrotiterschalen-Biofilmbildungstest41 mit Modifikationen durchgeführt. Die Schienenstücke wurden zweimal in destilliertem Wasser gewaschen, um Planktonzellen zu entfernen, und dann 15 Minuten lang in 0,1 % (w/v) CV-Lösung inkubiert. Später wurden die Fleckenreste mit destilliertem Wasser gewaschen und die befleckten Stücke über Nacht bei Raumtemperatur (RT) trocknen gelassen. Als nächstes fügten wir 30 % Essigsäure hinzu, um den CV 15 Minuten lang (RT) zu solubilisieren. Die Extrakte wurden dann in eine neue 96-Well-Platte mit flachem Boden (Nunc™) gegeben und mit einem Plattenlesegerät (ELx808™, Bio-Tek Instruments, Vermont, USA) gemessen.

Zur mikroskopischen Visualisierung des Biofilmwachstums auf den Schienenoberflächen haben wir 1 cm² große Stücke unbeschichteter Schienen, beschichteter Schienen ohne ZnCl2 und ZnCl2-beschichteter Schienen in eine 24-Well-Platte (Numc™) gelegt. Wir verdünnten einen erzeugten Starter auf 1:100 in LBGM-Medium und pipettierten dann 150 µL auf die Oberseite jedes Schienenstücks. Anschließend wurde die Platte unter statischen Bedingungen bei 37 °C inkubiert. Nach 24-stündiger Inkubation wurden erneut 150 µL frisch verdünnter Starter auf die Oberseite jeder Schienenoberfläche pipettiert und die Platte weitere 24 Stunden bei 37 °C für insgesamt 48 Stunden inkubiert. Später wurden die Stücke gewaschen und entsprechend dem Bakterienstamm fixiert, wie zuvor beschrieben42, mit geringfügigen Modifikationen, wie unten beschrieben. Als Fixiermittel wurde eine 4 %ige Glutaraldehydlösung verwendet, indem ein 8 %iger Glutaraldehydstamm (SPI Chem, Pennsylvania, USA) 1:1 mit doppelt destilliertem Wasser (DDW) verdünnt wurde. Eine 4 %ige Glutaraldehydlösung wurde einer üblichen 2,5 %igen Glutaraldehyd- und 2,5 %igen Formaldehydlösung vorgezogen, da sich das Experiment eher auf die Oberflächenmorphologie als auf die innere Struktur konzentrierte. Da Ethanol die vollständige Entfernung der wasserbasierten Biofilmschicht verursachte, wurde die Dehydratisierung nach der Fixierung stattdessen durch Lufttrocknung durchgeführt.

Bei Staphylococcus aureus wurden die Stücke unmittelbar nach der Inkubationszeit ohne vorherige Waschungen durch Zugabe von 300 µL 4 % Glutaraldehyd in jede Vertiefung fixiert. Nach einer Stunde Inkubation wurden die Stücke einmal in 400 µL phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) und einmal in 400 µL DDW jeweils 10 Minuten unter statischen Bedingungen (RT) gewaschen. Abschließend wurden die Stücke über Nacht (RT) an der Luft trocknen gelassen. Die Proben wurden bis zur mikroskopischen Auswertung bei 4 °C aufbewahrt.

Bei Enterobacter aerogenes und Pseudomonas aeruginosa wurden nach 48-stündiger Inkubation nicht anhaftende Zellen durch zweimaliges Waschen der Stücke in 400 µL PBS und einmal in 400 µL DDW, jeweils 10 Minuten unter statischen Bedingungen (RT), entfernt. Anschließend wurden die Stücke durch Zugabe von 300 µL 4 % Glutaraldehyd zu jeder Vertiefung für eine einstündige Inkubation unter statischen Bedingungen (RT) fixiert. Nach der Inkubation wurden die Stücke zweimal jeweils 10 Minuten lang in 400 µL DDW unter statischen Bedingungen (RT) gewaschen. Abschließend wurden die Stücke über Nacht (RT) an der Luft trocknen gelassen. Die Proben wurden bis zur mikroskopischen Auswertung bei 4 °C aufbewahrt.

Vor der mikroskopischen Auswertung wurden alle Schienenstücke, unabhängig vom Bakterienstamm, in vier gleichmäßige Stücke geschnitten, mit einer 1 nm dicken Goldschicht (Au/Pd) (QUORUM Q150T ES) beschichtet und dann mittels REM (JEOL, JSM-7800F, Tokio, Japan Schottky-Feldemissions-Rasterelektronenmikroskop). Die Bilder wurden mit einer Beschleunigungsspannung von 2 kV bei Vergrößerungen von 1.000, 10.000 und 20.000 aufgenommen.

Um die Wirksamkeit der Behandlung einzustufen, wurden die Bilder als hohe mikrobielle Belastung (Abb. 5a), mittlere mikrobielle Belastung (Abb. 6k) und niedrige mikrobielle Belastung (Abb. 5b) charakterisiert.

Für die CLSM-Visualisierung des Biofilmwachstums auf den Schienenoberflächen wurde das gleiche Wachstums- und Fixierungsprotokoll wie bei der Vorbereitung zur Bewertung der Wirksamkeit beschichteter Schienen gegen Biofilmbildung mittels REM durchgeführt. Vor der CLSM-Bewertung wurden die fixierten Schienenstücke mit Propidiumiodid (PI) (Rhenium) gefärbt, indem 130 µL PI in 870 µL DDW verdünnt wurden, um 1 ml Stammlösung zu erzeugen, in Alufolie bei 4 °C gelagert und weiter Verdünnung der PI-Stammlösung 1:10 in DDW. Dann wurden 300 µL der verdünnten PI-Lösung in jede Vertiefung gegeben. Anschließend erfolgte eine 30-minütige Inkubation, abgedeckt mit Alufolie (RT). Nach der Inkubation wurden die Schienenstücke mit 400 µL PBS gewaschen und bis zur mikroskopischen Auswertung, wie zuvor beschrieben, bei 4 °C in der PBS-Lösung belassen und mit Alufolie abgedeckt. Aufgrund früherer Erfahrungen mit Kathetern in unserem Labor und der Tatsache, dass alle Bakterien nach dem Fixierungsschritt nicht mehr lebten, wurde PI dem CV vorgezogen.

Das Biofilmwachstum auf den Schienenoberflächen wurde durch CLSM (LEICA SP8) bewertet und die Fluoreszenzintensität wurde unter Verwendung einer trockenen 20×/0,7 NA-Objektivlinse mit einem Zoomfaktor von 1,28, einer Anregung von 561 nm und einer Emission von 600–650 nm gemessen PMT-Verstärkung von 850 [V]. Pixelformat 1024 × 1024, Voxelgröße 0,446 × 0,446 × 2 µm (X, Y, Z) (Ergänzende Informationen).

Die Bildverarbeitung und -analyse erfolgte in den folgenden Schritten: (1) Die gespeicherte „.lif“-Datei wurde als einzelne „.tif“-Dateien mit einem Fidschi-Makro „ImageJ_Export-LIF-as-Individual-Images-master_pmascalchi“43 gespeichert. und (2) die Dateien wurden mit einem zweiten Makro „area_fraction_analysis.ijm“44 in acht verschiedenen Bereichen pro getesteter Probe verarbeitet und analysiert.

Wir untersuchten die Sicherheit der Verwendung von ZnCl2-beschichteten Schienen zur Vorbeugung von Nasenschleimhautinfektionen bei Ratten. Die Sicherheitsstudie wurde von der Beilinson-Ethikkommission genehmigt und im experimentellen Forschungslabor Frankel am Felsenstein Medical Research Center (Petah Tikva, 4.941.492, Israel) durchgeführt. In dieser Studie wurden 18 männliche und weibliche Sprague-Dawley (SD)-Ratten verwendet und gemäß den Standardrichtlinien gehalten. Eine interne Silikon-Nasenschiene (INS) und eine mit ZnCl2-Silikon beschichtete Schiene (Z-INS) wurden in 1 mm × 0,85 mm × 7 mm große Stücke geschnitten. Die Ratten wurden randomisiert in eine Kontrollgruppe, der INS implantiert wurde (n = 6), und eine Behandlungsgruppe, der Z-INS implantiert wurde (n = 12), eingeteilt. Die Schienen wurden 7 Tage lang in den rechten Nasengängen der Ratten platziert. Anschließend wurden die Gewebe entkalkt, zugeschnitten, in Paraffin eingebettet, geschnitten und zur histologischen Verarbeitung geschickt, die von der Forschungseinheit von PATHO-LAB Diagnostics Ltd. (Ness Ziona, Israel) durchgeführt wurde. Die histologische Auswertung erfolgte mit einem Lichtmikroskop BX43 Olympus und einer Digitalkamera DP21 Olympus mit der Software Olympus cellSens Entry 1.13. Die Proben wurden nach bekannten Parametern bewertet, wie in Şevik Eliçora et al.45 beschrieben.

Nach einer Nasenoperation führten Chirurgen des Hasharon-Krankenhauses (Kakal Street 7, Petah Tikva, Israel) anstelle der herkömmlichen unbeschichteten Schienen ZnCl2-beschichtete Schienen in die Nasenhöhlen von drei Patienten ein. Die Schienen wurden 7 Tage nach der Operation in der Nase des Patienten belassen und dann entfernt, in PBS gewaschen und mit 4 % Glutaraldehyd fixiert. Die Schienen wurden eine Stunde lang aushärten gelassen und dann zweimal jeweils 10 Minuten lang in PBS unter statischen Bedingungen (RT) gewaschen. Die Schienen wurden über Nacht (RT) an der Luft trocknen gelassen und schließlich bis zur mikroskopischen Auswertung bei 4 °C aufbewahrt.

Die Patienten, die an der Studie teilnahmen, verzichteten im Monat vor der Operation auf die Einnahme regelmäßiger Medikamente, Antibiotikabehandlungen, Nasensprays und Nasenätzmittel.

Die ethische Genehmigung für die Tierstudie und für alle Versuchsprotokolle wurde von der Ethikkommission des Rabin Medical Center (Helsinki) für die Erforschung der Auswirkungen von zinkbeschichteten Geräten auf Polymerbasis mit langsamer Freisetzung zur Infektionsprävention in Tiermodellen erteilt. Zulassungsnummer: 021219 für einen Zeitraum von 4 Jahren, beginnend am 01.12.19. Alle Methoden wurden in Übereinstimmung mit den relevanten Richtlinien und Vorschriften durchgeführt und werden gemäß den ARRIVE-Richtlinien berichtet.

Die ethische Genehmigung für die Humanstudie wurde von der Ethikkommission des Rabin Medical Center (Helsinki) für eine Phase-1-Studie am Menschen zur Erforschung der Verwendung von ZnCl2-beschichteten Schienen zur Verhinderung des Bakterienwachstums auf Nasenschienen erteilt. Zulassungsnummer: 0374-19-RMC für einen Zeitraum von einem Jahr, beginnend am 23.09.2021. Die gesamte Forschung wurde in Übereinstimmung mit den relevanten Richtlinien und Vorschriften durchgeführt und die Einverständniserklärung aller Probanden und/oder ihrer Erziehungsberechtigten wurde eingeholt.

Die erhaltenen numerischen Daten wurden statistisch mittels ANOVA nach einem Post-hoc-t-Test mit JMP-Software bei Signifikanz-p-Werten < 0,05 analysiert. Die Ergebnisse basieren auf drei biologischen Experimenten, die dreifach durchgeführt wurden.

Die Daten, die die Ergebnisse dieser Studie stützen, sind auf begründete Anfrage beim entsprechenden Autor erhältlich. Die während der aktuellen Studie generierten und/oder analysierten Datensätze sind im NIH-Repository unter den Zugangsnummern verfügbar: OQ195154, OQ195155, OQ195156, OQ195157, OQ195158 und OQ195159.

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Diese Arbeit wurde von der Israel Innovation Authority (70017) finanziell unterstützt.

Das Institut für Biochemie, Lebensmittelwissenschaft und Ernährung. Die Robert H. Smith-Fakultät für Landwirtschaft, Ernährung und Umwelt, die Hebräische Universität Jerusalem, Rehovot, Israel

Noa Noach & Ram Reifen

Die Koret School of Veterinary Medicine. Die Robert H. Smith-Fakultät für Landwirtschaft, Ernährung und Umwelt, die Hebräische Universität Jerusalem, Rehovot, Israel

waren Lavy

FACSI-Fakultät für Landwirtschaft, Zentrum für wissenschaftliche Bildgebung. Die Robert H. Smith-Fakultät für Landwirtschaft, Ernährung und Umwelt, die Hebräische Universität Jerusalem, Rehovot, Israel

Einat Zelinger

Die Fakultät für Pharmazie, die Medizinische Fakultät, Ein Kerem Campus, Die Hebräische Universität Jerusalem, Jerusalem, Israel

Michael Friedman und David Kirmayer

Abteilung für Hals-Nasen-Ohrenheilkunde, Kopf- und Halschirurgie, Rabin Medical Center, Petah Tikva, Israel

Amit Ritter, Dan Yaniv & Ella Reifen

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NN schrieb den Hauptmanuskripttext, EL koordinierte das Projekt, RR entwarf und leitete das Projekt, MF und DK bereiteten Schienenproben vor, EZ führte Elektronen- und Konfokalmikroskopie durch, AR und DY führten die klinische Nachuntersuchung durch und ER führte die Operation durch. Alle Autoren haben das Manuskript überprüft.

Korrespondenz mit Ram Reifen.

Die Autoren geben an, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Noach, N., Lavy, E., Reifen, R. et al. Zinkchlorid ist als Antibiotikum zur Biofilmprävention nach einer Septumplastik wirksam. Sci Rep 13, 8344 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-35069-9

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Eingegangen: 02. Januar 2023

Angenommen: 11. Mai 2023

Veröffentlicht: 23. Mai 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-35069-9

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